ELISA試劑盒標本的重復凍融所發生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子發生損壞效果，然后導致假陰性成果。凍融標本的混勻亦應留意，不要進行劇烈振動，重復倒置混勻即可。標本在保留中如呈現細菌污染所形成的的混濁或絮狀物時，應離心沉積后取上清檢查。一些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會對用相應酶作符號的測定方法發生非特異性干擾。
ELISA試劑盒血清標本如是以無菌操作別離，則能夠在2～8℃下保留一周，如為有菌操作，則主張冰凍保留。要留意防止呈現嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團，其有相似過氧化物的活性。在以HRP為符號酶的ELISA測定中，如血清標本中血紅蛋白濃度較高，則其就很簡單在溫育過程中吸附于固相，然后與后邊加入的HRP底物反應顯色。
ELISA試劑盒樣本的收集及血清別離中要留意盡量防止細菌污染，一則細菌的生長，其所排泄的一些酶也許會對抗原抗體等蛋白發生分化效果。樣本的長期保留，應在-70℃以下。
