操作中應(yīng)嚴(yán)格按要求洗刷ELISA試劑盒

進(jìn)口ELISA試劑盒首要洗刷在ELISA過(guò)程中雖不是一個(gè)反響過(guò)程，但卻也決定著試驗(yàn)的勝敗。ELSIA就是靠洗刷來(lái)到達(dá)別離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的意圖。

ELISA試劑盒洗刷液運(yùn)用原則：

1.某一項(xiàng)意圖洗液主張運(yùn)用該試劑盒內(nèi)的洗液；

2.同一elisa試劑盒洗液用完了，主張選用同一批號(hào)的洗液；

3.同一批號(hào)的洗液也用完了，主張選用同一項(xiàng)意圖試劑洗液；

4.同一項(xiàng)意圖洗液用完了，主張運(yùn)用該項(xiàng)目其他廠家的洗液；
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5.同一項(xiàng)目一切廠家都用完了，主張選用同一系列項(xiàng)意圖洗液（比如甲乙丙丁戊庚肝抗體檢測(cè)，歸于肝炎系列，急用時(shí)能夠暫時(shí)混用）；

6.不主張國(guó)產(chǎn)洗液與進(jìn)口洗液混用，也更不主張不同系列項(xiàng)意圖洗液混用，這兩點(diǎn)都是由于洗液的配置成分不同，特別是不同項(xiàng)意圖洗液（正規(guī)試劑廠家），首要組分都不太一樣。

雖然對(duì)強(qiáng)陽(yáng)性標(biāo)本影響不是很大，但關(guān)于臨界陽(yáng)性陰性（灰區(qū)）標(biāo)本影響較大，所以不發(fā)起不同系列項(xiàng)目洗液混用。

進(jìn)口ELISA試劑盒洗刷方法：

（1）浸泡式

a.吸干或甩干孔內(nèi)反響液；

b.用洗刷液過(guò)洗一遍（將洗刷液注滿(mǎn)板孔后，即甩去）；

c.浸泡，行將洗刷液注滿(mǎn)板孔，放置1-2分鐘，間歇搖擺，浸泡時(shí)刻不行隨意縮短；

d.吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)*，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干；

e.重復(fù)操作c和d，洗刷3-4次（或按闡明規(guī)定）。在間接法中如本底較高，可增加洗刷次數(shù)或延長(zhǎng)浸泡時(shí)刻。

微量滴定板多選用浸泡式洗刷法。洗刷液多為含非離子型洗刷劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質(zhì)的結(jié)合是疏水性的，非離子型洗刷劑既含疏水基團(tuán)，也含親水基團(tuán)，其疏水基團(tuán)與蛋白質(zhì)的疏水基團(tuán)借疏水鍵結(jié)合，從而削弱蛋白質(zhì)與固相載體的結(jié)合，并借助于親水基團(tuán)和水分子的結(jié)合作用，使蛋白質(zhì)回復(fù)到水溶液狀況，從而脫離固相載體。洗刷液中的非離子型洗刷劑一般是吐溫20，其濃度可在0.05%-0.2%之間，高于0.2%時(shí)，可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗(yàn)的靈敏度。

（2）流水沖刷式

流水沖刷法zui初用于小珠載體的洗刷，洗刷液僅為蒸餾水乃至可用自來(lái)水。洗刷時(shí)附接一特殊設(shè)備，使小珠在流水沖擊下不斷地翻滾淋洗，持續(xù)沖刷2分鐘后，吸干液體，再用蒸餾水浸泡2分鐘，吸干即可。浸泡式猶如盆浴，流水沖刷式則好比淋浴，其洗刷作用更為*，且也簡(jiǎn)便、快速。已有試驗(yàn)標(biāo)明，流水沖刷式同樣也適用于微量滴定板的洗刷。洗刷時(shí)設(shè)法加大水流量或加大水壓，讓水流沖擊板孔表面，進(jìn)口ELISA試劑盒洗刷作用更佳。