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ELISA試劑盒如何制備？
發(fā)布時間： 2014-06-17 點擊次數(shù)： 1615次elisa技術流程ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，ELISA試劑盒受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。
ELISA試劑盒的制備程序
1。酸化尿液或組織勻漿增加200萬鹽酸PH值3.5。允許坐在4°為15
分鐘。離心機樣品中微量2分鐘去除沉淀。
2。編寫的C18反相柱洗10毫升乙醇其次是10毫升去離子水。
3。將樣品在一個輕微的正壓獲得流動率約0.5毫升/分鐘。洗衣服柱用10毫升水，其次是10毫升的15%乙醇，zui后10毫升已烷。洗脫樣本欄添加10毫升乙酸乙酯。
4。如果分析是立即執(zhí)行，蒸發(fā)樣本下的氮流。至少添加250µ信用分析緩沖區(qū)的干燥樣品。渦然后允許坐5分鐘的房間溫度。重復兩次。如果ELISA試劑盒分析是被延遲，如乙酸乙酯洗脫樣品溶液在-80°直到免疫是運行。蒸發(fā)有機溶劑流下的氮在運行前試驗和重組如上。
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