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      大鼠雌激素受體(estrogen receptor)說明書

      發(fā)布時間: 2010/8/4  點擊次數(shù): 828次
      提 供 商: 研域(上海)化學(xué)試劑有限公司 資料大小:
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      大鼠雌激素受體(estrogen receptor 

      本試劑盒僅供研究使用      標(biāo)本:血清或者血漿

       

      一、試 劑 組 成

      精密度微孔板96

      Microtitration Strips

      1

      28℃干燥保存

      酶標(biāo)偶合液

      Conjugate   

      1 12.0毫升

      28℃冷藏保存

      標(biāo)準(zhǔn)品

      Standard

      5瓶 各1.0毫升

      28℃冷藏保存

      呈色劑A

      Substrate A

      1 6.0毫升

      28℃避光冷藏保存

      呈色劑B

      Substrate B

      1 6.0毫升

      28℃避光冷藏保存

      終止液

      Stopping Solution

      1 6.0毫升

      室溫保存

      20倍濃縮洗滌液

      Rinsing Buffer x 20

      1 60.0毫升

      28℃冷藏保存

      5倍濃縮樣品稀釋液

      Diluent x 5

      1 15.0ml

      28℃冷藏保存

      英文說明書,中文說明書

       

      各一份

      室溫保存

       

      二、注意事項

      1.  此試劑為體外檢測試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號的試劑不能混用。

      2.  使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,

      3.  濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請于37℃孵育15分鐘。

      4.  濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請于37℃孵育15分鐘

      5.  24小時內(nèi)進(jìn)行實驗,標(biāo)本可存放于28℃。不需及時實驗,標(biāo)本-20℃保存,避免反復(fù)凍融。

      6.  在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低度,造成吸光度偏離的假像。

      7.  加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻。

      8.  試劑盒保存于28℃,請勿冷凍,有效期請見盒內(nèi)標(biāo)示。

       

      三、實驗前準(zhǔn)備

      1使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。

      2.準(zhǔn)備各種實驗儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等

      3濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水119倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液

      4濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水14倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液

      5.用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品,按照1100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)

       

      四、操 作 步 驟

      1.取出酶標(biāo)板,設(shè)空白孔,依照次序?qū)?yīng)分別加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)品于空白微孔中(空白孔視為0號標(biāo)準(zhǔn)品,用醫(yī)用蒸餾水替代

      2、分別標(biāo)記樣品編號,加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中(不同的樣本采用不同的吸頭)。

      3、將酶標(biāo)板置于37溫育30分鐘;

      4、將酶標(biāo)板板取出,將其中的液體甩去,每個孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后,立即甩去液體;

      5、每個孔中加滿應(yīng)用洗滌液后,輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。

      6、重復(fù)第5個步驟5次,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。

      7、在標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔中加入100μl的酶標(biāo)偶合溶液。

      8、將96孔板置于37溫育30分鐘。

      9、將酶標(biāo)板取出,將其中的液體甩去,每個孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后,立即甩去液體。

      10、每個孔中再次加滿洗滌應(yīng)用液后,室溫輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。

      11、重復(fù)第5個步驟5次,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。

      12、在每個孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻。A液、B液采用不同的吸頭加樣)

      13、將酶標(biāo)板置于37避光溫育反應(yīng)15分鐘。

      14、每個微孔中加入50μl的終止液,輕輕振蕩混勻。

      15、在酶標(biāo)儀上,450nm處測定OD; 顯色后,15分鐘內(nèi)進(jìn)行測定。

      16、根據(jù)制備的標(biāo)準(zhǔn)曲線,計算樣本含量

       

      五、結(jié) 果 判 斷

      1. 儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值。

      2.檢測值范圍:0 – 8.0ng/ml

      3.敏感度: 0.05ng/ml

       

       

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